Dr Helen Magnus (Amanda Tapping) är en vacker och gåtfull forskare som söker upp alla typer av skrämmande varelser. Med hjälp av hennes skyddsling, rättspsykiatriker Dr Will Zimmerman (Robin Dunne) och hennes orädda dotter Ashley (Emilie Ullerup), spårar Sanctuary-teamet upp, studerar och skyddar underliga och ofta skrämmande varelser som i hemlighet befolkar vår värld.